Возрастные изменения внеклеточных везикул семенной плазмы, выделенных путем асимметричной глубинной фильтрации
М. Ю. Гаврилов,
Н. П. Макарова,
А. С. Якимова,
П. А. Вишнякова,
В. Е. Карягина,
А. П. Сысоева,
Е. А. Евтушенко,
Е. А. Калинина https://doi.org/10.18705/2311-4495-2025-12-1-27-36
EDN: VBTDLD
Аннотация
Актуальность. Биологические жидкости организма содержат множество популяций внеклеточных везикул (ВВ), которые различаются по размеру, клеточному происхождению, молекулярному составу и биологической активности. В данном исследовании впервые был применен метод выделения ВВ из семенной плазмы (СП) с помощью асимметричной глубинной фильтрации без использования метода ультрацентрифугирования, который на данный момент является классическим в лабораторной практике. Цель. Подтвердить возможность использования нового метода выделения ВВ СП с помощью асимметричной глубинной фильтрации через полупроницаемую мембрану, который может послужить достойной альтернативой рутинному методу ультрацентрифугирования. Материалы и методы. Было отобрано 12 образцов семенной плазмы молодых мужчин и пациентов позднего репродуктивного возраста со слабо выраженной формой тератозооспермии. Из данных проб исследуемым методом были выделены ВВ СП. Вестерн-блот анализ на мембранные маркеры везикул CD9, CD63, CD81 показал присутствие ВВ СП в изучаемых образцах. Трансмиссионная электронная микроскопия также доказала присутствие ВВ СП. Были описаны морфологические особенности ВВ СП мужчин различного возраста. Количественные характеристики образцов ВВ СП оценивали с помощью Nanoparticle Tracking Analysis (NTA-анализ). Результаты. Полученные распре деления частиц по размерам и концентрации демонстрируют возрастные изменения ВВ СП: в препаратах группы позднего репродуктивного возраста выявлен сдвиг пика распределения в сторону частиц большего размера по сравнению с пиком распределения в группе молодых мужчин. Заключение. Полученные результаты дают основание для продолжения изучения ВВ СП и рассмотрения возможностей клинического использования ВВ СП в программах экстракорпорального оплодотворения.
Ключевые слова
внеклеточные везикулы,
экзосомы,
семенная плазма,
эякулят,
возраст,
простасомы,
бесплодие,
вспомогательные репродуктивные технологии
При поддержке: Работа выполнена в рамках инициативного научного проекта «Изучение влияния внеклеточных везикул биологических жидкостей репродуктивных органов и тканей на гаметы, процесс оплодотворения и раннего эмбриогенеза человека и имплантации» (2025-2027, руководитель Макарова Н.П.) ФГБУ «НМИЦ АГП им. Кулакова» МЗ РФ (директор академик РАН, профессор, д.м.н. Сухих Г.Т.)
Об авторах
М. Ю. Гаврилов
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В. И. Кулакова» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Россия
Конфликт интересов:
Россия
Гаврилов Максим Юрьевич, младший научный сотрудник отделения вспомогательных технологий в лечении бесплодия им. проф. Б. В. Леонова
Москва
Конфликт интересов:
Авторы заявили об отсутствии потенциального конфликта интересов
Н. П. Макарова
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В. И. Кулакова» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Россия
Конфликт интересов:
Россия
Макарова Наталья Петровна, д.б.н., ведущий научный сотрудник отделения вспомогательных технологий в лечении бесплодия им. проф. Б. В. Леонова
ул. Академика Опарина, д. 4, Москва, 117997
Конфликт интересов:
Авторы заявили об отсутствии потенциального конфликта интересов
А. С. Якимова
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В. И. Кулакова» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Россия
Конфликт интересов:
Россия
Якимова Александра Сергеевна, младший научный
сотрудник отделения вспомогательных технологий
в лечении бесплодия им. проф. Б. В. Леонова
Москва
Конфликт интересов:
Авторы заявили об отсутствии потенциального конфликта интересов
П. А. Вишнякова
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В. И. Кулакова» Министерства здравоохранения Российской Федерации; Научно-исследовательский институт молекулярной и клеточной медицины медицинского института, Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Российский университет дружбы народов имени Патриса Лумумбы»
Россия
Конфликт интересов:
Россия
Вишнякова Полина Александровна, к.б.н., руководитель лаборатории регенеративной медицины
Москва
Конфликт интересов:
Авторы заявили об отсутствии потенциального конфликта интересов
В. Е. Карягина
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В. И. Кулакова» Министерства здравоохранения Российской Федерации; Научно-исследовательский институт молекулярной и клеточной медицины медицинского института, Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Российский университет дружбы народов имени Патриса Лумумбы»
Россия
Конфликт интересов:
Россия
Карягина Виктория Евгеньевна, младший научный
сотрудник лаборатории регенеративной медицины
Москва
Конфликт интересов:
Авторы заявили об отсутствии потенциального конфликта интересов
А. П. Сысоева
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В. И. Кулакова» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Россия
Конфликт интересов:
Россия
Сысоева Анастасия Павловна, к.б.н., эмбриолог от
деления вспомогательных технологий в лечении бесплодия им. проф. Б. В. Леонова
Москва
Конфликт интересов:
Авторы заявили об отсутствии потенциального конфликта интересов
Е. А. Евтушенко
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Московский государственный университет имени М. В. Ломоносова»
Россия
Конфликт интересов:
Россия
Евтушенко Екатерина Алексеевна, к.б.н., старший
преподаватель биологического факультета
Москва
Конфликт интересов:
Авторы заявили об отсутствии потенциального конфликта интересов
Е. А. Калинина
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В. И. Кулакова» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Россия
Конфликт интересов:
Россия
Калинина Елена Анатольевна, д.м.н., профессор,
заведующая отделением вспомогательных технологий
в лечении бесплодия им. проф. Б. В. Леонова
Москва
Конфликт интересов:
Авторы заявили об отсутствии потенциального конфликта интересов
Список литературы
1. Roca J, et al. Extracellular vesicles in seminal flu id and effects on male reproduction. An overview in farm animals and pets. Animal Reproduction Science. 2022; 246:106853.
2. Neyroud AS, Chiechio R, Yefimova M, et al. Ex tra-cellular vesicles of the male genital tract: new actors in male fertility? Basic Clin. Androl. 2021;31(1):25. https://doi.org/10.1186/s12610-021-00141-9
3. Borges FT, Reis LA, Schor N. Extracellular vesi cles: structure, function, and potential clinical uses in renal diseases. Braz J Med Biol Res Rev Bras PesquiMedicas E Biol. 2013; 46:824–30.
4. Klutstein M, Gonen N. Epigenetic aging of mam malian gametes. Mol Reprod Dev. 2023 Dec;90(12):785 803. DOI: 10.1002/mrd.23717. Epub 2023 Nov 24. PMID: 37997675.
5. Kühnert B, Nieschlag E. Reproductive functions of the ageing male. Human Reproduction Update. Vol. 10, Issue 4. July 2004, P. 327–339. https://doi.org/10.1093/humupd/dmh030
6. Vashisht A, Gahlay GK. Understanding seminal plasma in male infertility: emerging markers and their implications. Andrology. 2024 Jul;12(5):1058–1077. DOI: 10.1111/andr.13563. Epub 2023 Nov 28. PMID: 38018348.
7. Parra A, et al. Seminal extracellular vesicles and their involvement in male (in) fertility: A systemat ic review. International Journal of Molecular Sciences. 2023;24(5):4818.
8. Li H, et al. Cell-free seminal mRNA and micro- RNA exist in different forms //PloS one. 2012;7(4): 34566.
9. Crescitelli R, et al. Distinct RNA profiles in sub populations of extracellular vesicles: apoptotic bodies, mi crovesicles and exosomes //Journal of extracellular vesicles. 2013;2(1):20677.
10. Aalberts M, et al. Identification of distinct popu lations of prostasomes that differentially express prostate stem cell antigen, annexin A1, and GLIPR2 in humans // Biology of reproduction. 2012;86(3):82, 1–8.
11. Chernyshev VS, et al. Asymmetric depth-filtration: A versatile and scalable method for high-yield isolation of extracellular vesicles with low contamination //Journal of Extracellular Vesicles. 2022;11(8):e12256.
12. Gardiner C, et al. Measurement of refractive in dex by nanoparticle tracking analysis reveals heterogeneity in extracellular vesicles //Journal of extracellular vesicles. 2014;3(1):25361.
13. Wang D, et al. Seminal plasma and seminal plasma exosomes of aged male mice affect early embryo implantation via immunomodulation. Front. Immunol. 2021; 12:723409.
14. Frungieri MB, Calandra RS, Bartke A, Matzkin ME. Ageing and inflammation in the male reproductive tract. Andrologia. 2018 Dec;50(11):e13034. DOI: 10.1111/and.13034. Epub 2018 May 8. PMID: 29740839.
15. Zhang Y, Liu Y, Liu H, Tang WH. Exosomes: bio genesis, biologic function and clinical potential. Cell Bios ci. 2019;19(1):9.
16. Frungieri MB, Calandra RS, Bartke A, Matzkin ME. Ageing and inflammation in the male reproduc tive tract. Andrologia. 2018;50(11):e13034. DOI:10.1111/and.13034.
Рецензия
Для цитирования:
Гаврилов М.Ю., Макарова Н.П., Якимова А.С., Вишнякова П.А., Карягина В.Е., Сысоева А.П., Евтушенко Е.А., Калинина Е.А. Возрастные изменения внеклеточных везикул семенной плазмы, выделенных путем асимметричной глубинной фильтрации. Трансляционная медицина. 2025;12(1):27-36. https://doi.org/10.18705/2311-4495-2025-12-1-27-36. EDN: VBTDLD
For citation:
Gavrilov M.Y., Makarova N.P., Yakimova A.S., Vishnyakova P.A., Karyagina V.E., Sysoeva A.P., Evtushenko E.A., Kalinina E.A. Age-related changes in extracellular vesicles of seminal plasma isolated by asymmetric depth-filtration. Translational Medicine. 2025;12(1):27-36. (In Russ.) https://doi.org/10.18705/2311-4495-2025-12-1-27-36. EDN: VBTDLD
Просмотров:
33
Послать статью по эл. почте 