Исследование циркулирующих внеклеточных везикул различного клеточного происхождения и их активности у пациентов с посттромбоэмболическим синдромом

Актуальность. Хроническая тромбоэмболическая легочная гипертензия (ХТЭЛГ) и хроническая тромбоэмболическая болезнь (ХТЭБ) — проявления посттромбоэмболического синдрома у пациентов, перенесших тромбоэмболию легочной артерии (ТЭЛА). Было показано, что внеклеточные везикулы (ВВ) различного клеточного происхождения участвуют в патогенезе данных заболеваний благодаря активации системы гемостаза.

Цель. Оценка относительного количества ВВ и их коагуляционной активности с помощью теста генерации тромбина у пациентов с посттромбоэмболическим синдромом.

Материалы и методы. В исследование включен 21 пациент: группа ХТЭБ (n = 7) (ДЛА < 25 мм рт. ст.) и группа ХТЭЛГ (n = 14) с прекапиллярной ЛГ. Группа сравнения — доноры (n = 11) без сердечно-сосудистых и тромбоэмболических заболеваний в анамнезе. ВВ выделяли набором Exo-FACS и анализировали методом проточной цитометрии с использованием флуоресцентно меченных антител к клеточным маркерам. Оценка активности микрочастиц проводилась в тесте генерации тромбина с использованием триггерного реактива без добавления ТФ с помощью планшетного флюориметра.

Результаты. У пациентов с ХТЛГ и ХТЭБ относительное содержание внеклеточных везикул тромбоцитарного и эндотелиального происхождения выше по сравнению с группой контроля. Уровень тромбоцитарных внеклеточных везикул коррелирует с уровнями СРБ и D-димера. В тесте генерации тромбина у пациентов с ХТЭЛГ значимо увеличено LT и ttPeak относительно контроля.

Выводы. Повышение уровня ВВ тромбоцитарного и эндотелиального происхождения у пациентов с ХТЭЛГ и ХТЭБ свидетельствует о вкладе микровезикуля

ции в формирование посттромбоэмболического синдрома. Понижение активности генерации тромбина под действием ТФ-ВВ возможна в результате эффекта потребления ТФ при эндотелиальной дисфункции либо при длительной активации прокоагулянтных путей.

1. Lachant D, Bach C, Wilson B, et al. Clinical and imaging outcomes after intermediate — or high-risk pulmonary embolus. Pulm Circ. 2020; 10(3):2045894020952019. DOI: 10.1177/2045894020952019.

2. Simonneau G, Torbicki A, Dorfmüller P, et al. The pathophysiology of chronic thromboembolic pulmonary hypertension. Eur Respir Rev. 2017; 26(143):160112. DOI: 10.1183/16000617.0112-2016.

3. Pang W, Zhang Z, Wang Z, et al. Higher Incidence of Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension After Acute Pulmonary Embolism in Asians Than in Europeans: A Meta-Analysis. Front Med (Lausanne). 2021; 8:721294. DOI: 10.3389/fmed.2021.721294.

4. Held M, Kolb P, Grün M, et al. Functional Characterization of Patients with Chronic Thromboembolic Disease. Respiration. 2016; 5091(6):503–9. DOI: 10.1159/000447247.

5. Ramírez P, Otero R, Barberà JA. Pulmonary chronic thromboembolic disease. Arch Bronconeumol. 2020; 56(5):314–321. DOI: 10.1016/j.arbr.2020.03.007.

6. Konstantinides SV. Chronic thromboembolic disease following pulmonary embolism: more work ahead. Eur Respir J. 2020; 55(4):2000229. DOI: 10.1183/13993003.00229-2020.

7. Delcroix M, Torbicki A, Gopalan D, et al. ERS statement on chronic thromboembolic pulmonary hypertension. Eur Respir J. 2021; 57(6):2002828. DOI: 10.1183/13993003.02828-2020.

8. Kato F, Tanabe N, Ishida K, et al. CoagulationFibrinolysis System and Postoperative Outcomes of Patients With Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension. Circ J. 2016; 80(4):970–979. DOI: 10.1253/circj.CJ-15-1208.

9. Frey MK, Alias S, Winter MP, et al. Splenectomy is modifying the vascular remodeling of thrombosis. J Am Heart Assoc. 2014; 3(1):e000772. DOI: 10.1161/JAHA.113.000772.

10. Khandagale A, Åberg M, Wikström G, et al. Role of Extracellular Vesicles in Pulmonary Arterial Hypertension: Modulation of Pulmonary Endothelial Function and Angiogenesis. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 2020; 40(9):2293–2309. DOI: 10.1161/ATVBAHA.120.314152.

11. Mohan A, Agarwal S, Clauss M, et al. Extracellular vesicles: novel communicators in lung diseases. Respir Res. 2020; 21(1):175. DOI: 10.1186/s12931-020-01423-y.

12. Diehl P, Aleker M, Helbing T, et al. Increased platelet, leukocyte and endothelial microparticles predict enhanced coagulation and vascular inflammation in pulmonary hypertension. J Thromb Thrombolysis. 2011; 31(2):173–179. DOI: 10.1007/s11239-010-0507-z.

13. Alias S, Lang IM. Coagulation and the vessel wall in pulmonary embolism. Pulm Circ. 2013; 3(4):728–738. DOI: 10.1086/674768.

14. Bidot L, Jy W, Bidot C Jr, et al. Microparticlemediated thrombin generation assay: increased activity in patients with recurrent thrombosis. J Thromb Haemost. 2008; 6(6):913–919. DOI: 10.1111/j.1538-7836.2008.02963.x.

15. Galiè N, Humbert M, Vachiery JL, et al. 2015 ESC/ERS Guidelines for the diagnosis and treatment of pulmonary hypertension: The Joint Task Force for the Diagnosis and Treatment of Pulmonary Hypertension of the European Society of Cardiology (ESC) and the European Respiratory Society (ERS): Endorsed by: Association for European Paediatric and Congenital Cardiology (AEPC), International Society for Heart and Lung Transplantation (ISHLT). Eur Heart J. 2016; 37(1):67–119. DOI: 10.1093/eurheartj/ehv317.

16. Lacroix R, Judicone C, Mooberry M, et al. Standardization of pre-analytical variables in plasma microparticle determination: results of the international society on thrombosis and haemostasis SSC collaborative workshop. J Thromb Haemost. 2013; 2:10.1111/jth.12207.

17. Melnichnikova O, Zhilenkova Y, Sirotkina O et al. Circulating Small Extracellular Vesicles Profiling and Thrombin Generation as Potential Markers of Thrombotic Risk in Glioma Patients. Front. Cardiovasc. Med. 2022; 9:789937.

18. Hemker HC, Giesen P, Al Dieri R, et al. Calibrated automated thrombin generation measurement in clotting plasma. Pathophysiol Haemost Thromb. 2003; 33(1):4–15. DOI: 10.1159/000071636.

19. Guth S, D’Armini AM, Delcroix M, et al. Current strategies for managing chronic thromboembolic pulmonary hypertension: results of the worldwide prospective CTEPH Registry. ERJ Open Res. 2021; 7(3):00850–2020. DOI: 10.1183/23120541.00850-2020.

20. Dodson MW, Sumner K, Carlsen J, et al. The Factor V Leiden variant and risk of chronic thromboembolic pulmonary hypertension. Eur Respir J. 2020; 56(4):2000774. DOI: 10.1183/13993003.00774-2020.

21. Yang M, Deng C, Wu D, et al. The role of mononuclear cell tissue factor and inflammatory cytokines in patients with chronic thromboembolic pulmonary hypertension. J Thromb Thrombolysis. 2016; 42(1):38–45. DOI: 10.1007/s11239-015-1323-2.

22. Skoro-Sajer N, Gerges C, Gerges M, et al. Usefulness of thrombosis and inflammation biomarkers in chronic thromboembolic pulmonary hypertension-sampling plasma and surgical specimens. J Heart Lung Transplant. 2018; 37(9):1067–1074. DOI: 10.1016/j.healun.2018.04.003.

23. Sharma S, Lang IM. Current understanding of the pathophysiology of chronic thromboembolic pulmonary hypertension. Thromb Res. 2018; 164:136–144. DOI: 10.1016/j.thromres.2017.06.011.

24. Чазова И.Е., Карабашева М.Б., Данилов Н.М. и др. Хроническая тромбоэмболическая легочная гипертензия: современный взгляд на проблему. Кардиологический вестник. 2019; 14(2):14–23. DOI: 10.17116/Cardiobulletin20191402114.

25. Newnham M, South K, Bleda M, et al. The ADAMTS13-VWF axis is dysregulated in chronic thromboembolic pulmonary hypertension. Eur Respir J. 2019; 53(3):1801805. DOI: 10.1183/13993003.01805-2018.

26. Banaszkiewicz M, Gąsecka A, Darocha S, et al. Circulating Blood-Based Biomarkers in Pulmonary Hypertension. J Clin Med. 2022; 11(2):383. DOI: 10.3390/jcm11020383.

27. Amabile N, Rautou PE, Tedgui A, et al. Microparticles: key protagonists in cardiovascular disorders. Semin Thromb Hemost. 2010; 36(8):907–916. DOI: 10.1055/s-0030-1267044.

28. Ohayon L, Zhang X, Dutta P. The role of extracellular vesicles in regulating local and systemic inflammation in cardiovascular disease. Pharmacol Res. 2021; 170:105692. DOI: 10.1016/j.phrs.2021.105692.

29. Amabile N, Heiss C, Real WM, et al. Circulating endothelial microparticle levels predict hemodynamic severity of pulmonary hypertension. Am J Respir Crit Care Med. 2008; 177(11):1268–1275. DOI: 10.1164/rccm.2007101458OC.

30. Amabile N, Heiss C, Chang V, et al. Increased CD62e(+) endothelial microparticle levels predict poor outcome in pulmonary hypertension patients. J Heart Lung Transplant. 2009; 28(10):1081–1086. DOI: 10.1016/j.healun.2009.06.005.

31. Gasa N, Meiring M. Microparticles: a link to increased thrombin generation. Blood Coagul Fibrinolysis. 2021; 32(3):204–208. DOI: 10.1097/MBC.0000000000001018.

32. Melnichnikova O, Simakova M, Moiseeva O, et al. The dynamics of thrombin formation in patients with pulmonary arterial hypertension. Thromb Res. 2021; 208:230–232. DOI: 10.1016/j.thromres.2021.07.015.

33. Vrigkou E, Tsangaris I, Bonovas S, et al. Platelet and coagulation disorders in newly diagnosed patients with pulmonary arterial hypertension. Platelets. 2019; 30(5):646–651. DOI: 10.1080/09537104.2018.1499890.